Kultur sel. Fraksinasi sel.

Untuk menumbuhkan sel di laboratorium, sampel jaringan dengan karakteristik embrio diambil dan sel dipisahkan. Dengan cara ini, sel-sel individu yang mampu bertahan hidup dan berkembang biak diisolasi dalam wadah yang sesuai (piring kultur), jika mereka disuplai dengan media kultur dengan nutrisi dan faktor pertumbuhan.  

Sel hewan biasanya mati setelah sejumlah pembelahan dalam kultur (sekitar 50 untuk sel manusia). Namun, terkadang sel muncul dalam kultur yang dapat terus membelah tanpa batas, membentuk garis sel yang digunakan di laboratorium di seluruh dunia. Garis sel pertama berasal dari tumor; beberapa telah digunakan selama lima puluh tahun.

Sel-sel dari garis sel tertentu tidak identik, karena mereka mengalami mutasi dari waktu ke waktu. Bila Anda ingin memastikan bahwa semua sel identik, Anda mengisolasi sel dan bekerja dengan grup sel turunan atau klon .

Dalam kultur, fusi dua sel dari asal yang berbeda dapat diinduksi, membentuk heterokariota (sel dengan dua inti), yang memungkinkan untuk mempelajari interaksi antara dua sel. Heterokaryotes menimbulkan sel hibrida yang benar, dengan inti tunggal di mana beberapa kromosom dari satu sel dan inti lengkap yang lain yang tersisa secara acak £ 1 

Fraksinasi sel

Untuk menganalisis isi sel, sel-sel tersebut dipilah, dipecah perlahan dan organel-organelnya yang berbeda dipisahkan. Untuk ini, homogenat atau ekstrak sel yang rusak disentrifugasi dengan kecepatan tinggi. Ini menciptakan medan gravitasi buatan yang membuat partikel sel cenderung mengendap di dasar tabung. Secara umum, semakin besar partikel, semakin cepat ia bergerak ke dasar tabung. Melalui sentrifugasi berturut-turut pada kecepatan yang lebih tinggi dan lebih tinggi, endapan komponen yang lebih kecil dan lebih kecil diperoleh. Fraksi ini mempertahankan aktivitas biologisnya, yang merupakan sistem bebas sel, yaitu ekstrak di mana kita dapat mempelajari proses tertentu tanpa pengaruh komponen seluler lainnya.

Jika diinginkan untuk memisahkan molekul atau kompleks molekul dari fraksi sel tertentu, digunakan ultrasentrifugasi gradien densitas. Ekstrak ditempatkan pada tabung centrifuge, yang harus berisi larutan dengan kepadatan yang meningkat di seluruh tabung. Saat peralatan diputar dengan kecepatan yang sangat tinggi, bahan sampel bergerak di sepanjang tabung dalam pita sempit. Laju sedimentasi dari setiap komponen seluler (dinyatakan dalam satuan S atau Svedberg) adalah karakteristik khas yang bergantung pada ukuran dan bentuknya. Di lain waktu, tabung centrifuge berisi gradien diskontinyu, dengan nilai kerapatan yang lebih tinggi, sehingga setiap partikel bergerak melalui tabung hingga mencapai area yang tidak dapat dilewatinya karena memiliki kerapatan yang lebih tinggi darinya. Ini adalah metode kesetimbangan sedimentasi.

Untuk memisahkan makromolekul, metode yang digunakan dalam pemisahan protein juga dapat digunakan: kromatografi dan elektroforesis.

Related Posts