Dalam studi genetik ada dua pendekatan dasar untuk masalah. Metode pertama, yang disebut genetika langsung, adalah salah satu upaya yang dilakukan untuk mengetahui gen yang menyebabkan fungsi yang diketahui. Dalam metodologi ini, mutasi acak dibuat dalam genom dan diharapkan dapat melihat perubahan fungsi yang ingin kita pelajari. Ini adalah strategi tradisional yang telah digunakan untuk mempelajari penyakit, di mana mengetahui apa efek fenotipik, penyakit dan gejalanya, daerah materi genetik yang mengalami perubahan telah dicari untuk menghubungkan kedua faktor tersebut.
Metodologi lain yang sering digunakan adalah reverse genetics. Di dalamnya, kita mulai dari wilayah DNA yang ingin kita pelajari dan dengan memasukkan mutasi pada urutan tersebut diharapkan dapat mengamati fenotipe, perubahan individu yang membantu menjelaskan apa fungsi dari wilayah DNA tersebut, dalam jenis penyakit ini.penelitian menggunakan genetika molekuler dan teknik transgenesis untuk melakukan mutasi.
Salah satu teknik yang paling banyak digunakan dalam genetika terbalik adalah pengolahan. Teknik ini telah dikembangkan terutama pada tanaman, di mana dimungkinkan untuk bekerja dengan sejumlah besar individu pada saat yang bersamaan. Dalam pengolahannya, mutagen kimia (etilmetanasulfonat) digunakan pada benih. Mutagen ini menyebabkan perubahan DNA acak. Saat tanaman tumbuh, gen yang diinginkan dianalisis menggunakan PCR dan teknik sekuensing untuk menemukan individu yang telah diubah untuk mempelajarinya.
Teknik lain yang paling umum untuk genetika terbalik adalah mutagenesis yang diarahkan PCR. Baca lebih lanjut tentang apa itu PCR (reaksi berantai polimerase, segera hadir). Dalam teknik ini perlu untuk memperkenalkan gen yang diinginkan ke dalam plasmid kecil. Selanjutnya, primer DNA yang mengandung mutasi titik pada gen yang diinginkan digunakan dan salinan plasmid yang diubah dengan gen yang diinginkan dibuat melalui polimerase. Gen yang bermutasi kemudian dimasukkan kembali ke dalam genom asli menggunakan teknik genetika molekuler.
Banyak mutasi yang digunakan dalam genetika terbalik dihasilkan dari pengenalan RNA transfer ke dalam urutan gen atau promotornya. Tergantung pada tempat di mana tRNA dimasukkan, keefektifan protein yang dihasilkan dapat diubah dalam rentang yang sangat bervariasi, dari tidak berfungsi hingga hampir tidak ada perubahan. Mutasi ini dengan demikian memberikan gambaran tentang daerah mana yang paling penting untuk aktivitas protein. Teknik ini sering digunakan untuk membuat perubahan pada gen tikus, di mana kematian beberapa mutan membuat studi tentang perubahan genetik menjadi tidak mungkin.
Teknik genetika terbalik digunakan dalam studi obat dan vaksin terhadap penyakit genetik dan virus, jauh lebih cepat dan efisien daripada teknik genetik langsung, di mana gen penyebab harus ditemukan. Selain itu, mereka juga digunakan untuk mendapatkan spesies transgenik dengan karakteristik khusus tanpa mengubah genom spesies lainnya.