Metode studi sel (IV)

Eksplorasi fungsional in situ.

Metode ini memungkinkan untuk mengidentifikasi dan menemukan senyawa yang berbeda. Kimia – sel monyet menggunakan pewarna, tetapi juga memungkinkan untuk memperoleh fraksi subseluler dengan sentrifugasi dan mendeteksi aktivitas masing-masing bagian sel.

Sitokimia dan ekstraksi selektif.

Pewarnaan sitokimia dilakukan dengan pewarna yang secara selektif mengikat kelompok molekul tertentu seperti protein, lipid, asam nukleat, dan polisakarida. Kehadiran protein ditentukan untuk melihat – cepat, yang mengikat kelompok dasar bebas. Contie protein – tirosin nen ditentukan oleh reaksi Juta, di mana reagen nitroso-merkuri bereaksi dengan kelompok tirosin memberikan endapan merah. Lemak diidentifikasi dengan osmium tetroksida, warna hitam, Sudan III atau dengan warna merah. Polisakarida dinding tanaman (selulosa) dengan metil hijau. DNA dan karbohidrat tertentu dapat didemonstrasikan dengan reagen pada gugus aldehida (reagen Schiff) yang mengandung fuchsin basa yang diolah dengan sul anhidrida – Furoso. Dalam kelompok ini, reaksi PAS dan Feulgen menonjol.

Fraksinasi sel.

Ini terdiri dari pemecahan sel dengan metode fisik, yang memungkinkan fraksi subseluler dipisahkan menurut massa dan berat spesifiknya. Dengan cara ini, berbagai organel dan struktur subseluler dapat dipelajari. Meto – do yang paling banyak digunakan adalah ultrasentrifugasi diferensial, yang melaluinya diendapkan berbagai komponen seluler sesuai dengan laju sedimentasi.

Sitoenzimologi.

Di dalam sel, keberadaan enzim tertentu dapat dideteksi torsi – produk dari aktivitasnya. Misalnya, dalam kasus fosfatase, jaringan diinkubasi dalam media yang mengandung fosfat (substrat) dan garam timbal yang larut. Kehadiran enzim menghasilkan pelepasan fosfat dan pembentukan endapan timbal fosfat yang tidak tembus elektron.

imunositokimia.

Untuk menemukan zat sel yang memiliki sifat antigenik (pro – teínas, glikoprotein) dapat digunakan kemampuannya untuk membentuk kompleks dengan antibodi. Zat X disuntikkan ke hewan (kelinci, tikus), antibodi yang dibentuk olehnya (anti-X) diekstraksi dan dimurnikan. Ini anti – badan yang berhubungan dengan elektron molekul buram (feritin) atau ke enzim mudah terdeteksi. Dalam satu kehadiran substansi X, anti – body “ditandai” bentuk dengan itu terlihat dan terdeteksi dengan mikro kompleks – salinan elektronik.

Autoradiografi

Ketika sel diberi metabolit yang diberi label dengan atom radioaktif, sel menggunakannya dengan cara yang sama seperti menggunakan isotop non-radioaktif dalam proses sintesisnya. Atom dimasukkan ke dalam komponen natu – sel ral dan digunakan sebagai sebuah penanda. Prekursor berlabel tritium umumnya digunakan. Sebagai pembawa ini atom uti – daftar molekul yang dapat dimasukkan secara khusus dalam com – makromolekul plex (timidin untuk DNA, uridin untuk RNA, aminoá – asam protein, polisakarida menjadi monosakarida).

Deteksi radioaktivitas dimasukkan dilakukan dengan menerapkan – tion dari emulsi fotografi pada pemotongan: radiasi yang dipancarkan oleh atom radioaktif terkesan emulsi kemudian terungkap sebagai film fotografi biasa. Butir perak metalik gila – lizan pada struktur yang telah memasukkan atom radioaktif.

Related Posts