noda Giemsa

Di antara teknik penelitian yang paling umum dalam biologi, khususnya dalam sitologi dan histologi, adalah pewarnaan kultur dan jaringan. Mungkin salah satu pewarnaan yang paling terkenal, karena kesederhanaannya, biaya rendah dan efisiensinya, adalah pewarnaan Giemsa , yang memungkinkan pengamatan diferensial dari inti sel dan sitoplasma, karena DNA diwarnai dengan warna biru yang kuat. Pewarnaan ini digunakan pada organisme tanpa dinding sel dan eukariota (dengan nukleus). Anda juga dapat membaca lebih lanjut tentang pewarna lain yang paling sering digunakan pada hewan, yaitu pewarnaan eosin dan hematoxylin, di sini . Pewarnaan GRAM lebih umum untuk pewarnaan bakteri, yang dapat Anda baca lebih lanjut di sini .

Dengan pewarnaan Giemsa Anda dapat melihat parasit dalam darah, seperti Trypanosoma evansi, di foto.

Pada tahun 1904, Dr. Gustav Giemsa dari Jerman menerbitkan sebuah buku di mana ia merinci prosedurnya sendiri yang dioptimalkan untuk pewarnaan flagellate eukariota, sel darah dan bakteri. Dalam buku ini, Giemsa menjelaskan perbaikan yang dia buat pada pewarna Romanowsky (eosin dan metilen biru), menggabungkan gliserol ke dalam campuran untuk menstabilkan kedua senyawa, memungkinkan reproduktifitas yang lebih besar dari pengamatan mikroskopis.

Pewarnaan Giemsa masih digunakan dalam sitogenetika untuk mengamati DNA dalam keadaan kondensasi yang berbeda karena memungkinkan pengamatan kromosom selama mitosis dan bahkan DNA mitokondria. The biru metilen dari pewarnaan Giemsa mengikat kuat ke daerah kaya adenin dan timin pada DNA memberikan bandeng khas. Mata yang terampil mampu melihat, selama mitosis, aberasi kromatik (duplikasi, delesi, atau translokasi daerah kromosom) dengan pengamatan pita yang membandingkan pita dua kromosom yang dipasangkan. Hal ini juga digunakan untuk diagnosis patologis dalam darah atau apusan sumsum tulang untuk mendeteksi beberapa parasit seperti rickettsiae, malaria plasmodium atau trypanosomes (segera). Beberapa jenis sel, seperti sel mast dan basofil, adalah jenis sel dengan inti besar yang dapat dikenali pada apusan darah yang diwarnai dengan giemsa.

Pewarna giemsa terdiri dari eosin, metilen biru dan biru B , meskipun hari ini umum untuk menemukan semuanya bersama-sama. Kapasitas penetrasi noda memungkinkan pengamatan bagian antara 3 dan 6 mikron. Sebelum pewarnaan sampel harus dikeringkan, sehingga biasanya ditempatkan di penangas metana, berturut-turut lebih murni (50%, 75% dan 99%), selama sekitar 30 detik. Setelah sampel dehidrasi biasanya direndam antara 10 menit dan setengah jam dalam larutan giemsa 5% atau 10%.

The eosin adalah pewarna asam, sehingga membelah struktur dasar seperti sitoplasma atau eritrosit . Di sisi lain , metilen biru memiliki pH basa dan akan mengikat struktur dan molekul asam, seperti DNA, sehingga akan menodai inti biru atau ungu. Bakteri, yang memiliki DNA di sitoplasma, benar-benar berwarna biru. Struktur seluler lainnya, yang pH-nya tidak ekstrem seperti DNA, dapat memperoleh noda antara biru dan ungu . PH pewarna harus seimbang sekitar 6,5 agar pewarnaan tidak hilang keseimbangan.

Related Posts