Salah satu teknik yang paling banyak digunakan dalam histologi hewan adalah pewarnaan hematoxylin dan eosin. Karakteristik senyawa yang menyusunnya memungkinkan untuk mengamati sel-sel individual dan intinya di bawah mikroskop cahaya , yang diwarnai secara berbeda. Berkat teknik ini, sejumlah besar jaringan hewan telah diamati. Sebagian besar jaringan otot dan kelenjar tubuh telah dijelaskan di bawah pewarnaan ini. Menyediakan morfologi sel-sel yang membentuk jaringan dan posisi relatif dan bentuk nukleus di dalamnya.
Trombosit darah, karena tidak memiliki nukleus, tidak berwarna biru, seperti halnya neutrofil di foto
Pewarnaan hematoxylin eosin telah dikenal sejak paruh kedua abad ke-19 . Namun, ada beberapa variasi, mengubah jenis eosin (ada eosin Y, disebut kuning atau kuning dan eosin B, biru atau biru) dan hematoxylin spesifik (ada Harris hematoxylin, Mayer) untuk mendapatkan hasil yang lebih jelas tergantung pada jaringan. untuk dirawat.
Protokol : Salah satu keuntungan dari pewarnaan ini adalah mudah dilakukan dan membutuhkan sedikit instrumentasi. Pertama, jika sampel tertanam dalam parafin, itu harus dihidrasi. Parafin biasanya digunakan untuk memasukkan sampel sehingga pemotongan mikrotomi dapat dilakukan, mendapatkan potongan yang sangat halus. Untuk menghidrasi sampel, sampel direndam dalam rendaman xiliol dan etanol berturut-turut dalam konsentrasi menurun dari 100º ke 70º dan akhirnya dalam air. Pada titik ini sampel direndam dalam hematoxylic selama sekitar 10 menit. Setelah pencucian singkat dengan air dan alkohol untuk menghilangkan kelebihan hematoxylin, itu diwarnai selama 30 detik dalam eosin. Akhirnya, mandi dilakukan dalam alkohol dengan konsentrasi yang meningkat , untuk mengeringkan sampel lagi dan memungkinkan fiksasi sebelum pengamatan sampel di mikroskop.
Hematoxylin : senyawa ini diekstrak dari Haematoxylum campechianum , tanaman legum asli dari semenanjung Yucatan, Meksiko. Sebagai penasaran, nama tanaman ini berarti kayu yang berdarah. Suatu zat diperoleh dari tanaman yang, ketika dioksidasi, memperoleh warna ungu . Untuk meningkatkan kapasitas pewarnaannya, dikombinasikan dengan ion logam besi atau aluminium , sehingga diperoleh hematoxylin. Hematoxylin berikatan kuat dengan muatan negatif (anion), seperti asam. Inilah sebabnya mengapa ia mengikat kuat pada DNA (asam deoksiribonukleat). Pewarnaan hematoxylin menodai inti biru.
Eosin : perbedaan praktis dalam penggunaan eosin kuning atau biru minimal, dengan lebih banyak digunakan eosin Y. Kedua senyawa tersebut diperoleh dari interaksi bromin dengan fluorescein. Muatan negatif senyawa membuatnya mengikat senyawa dengan muatan positif, yaitu yang basa, seperti sitoplasma. Namun, muatan yang sama inilah yang mencegahnya menembus ke dalam sel hidup, karena membran sel mengeluarkannya.
The mercurochrome (yang komponen merah mecromina yang ) adalah senyawa analog dengan eosin , juga menodai struktur dasar sel. Eosin mewarnai sitoplasma sel menjadi merah muda atau merah, tergantung pada waktu pewarnaan dan pencucian yang diberikan pada sampel. The sel darah merah berwarna merah, sedikit oranye dan merah serat otot, hampir fuchsia.