Fluorescein

Fluorescein adalah zat dalam keluarga xanthine, itu adalah garam natrium dari resorsinol phthalein. Ini memiliki sifat pewarnaan dan fluorescent. Larut dalam air dan berwarna kuning. Ketika ditemukan dalam larutan dengan pH lebih dari lima, warnanya berubah menjadi hijau dan sangat berpendar. Berkat ikatan rangkap terkonjugasinya, ia mampu menangkap foton berenergi tinggi dan mengembalikannya sebagai foton berenergi rendah. Dengan kata lain, fluorescein menangkap cahaya pada panjang gelombang tertentu, dan memancarkan cahaya pada panjang gelombang yang lebih panjang. Energi yang hilang dalam proses diterjemahkan menjadi panas (getaran molekul). Ini adalah proses yang terjadi dalam waktu yang sangat singkat, dalam urutan sepersejuta detik.

Struktur kimia fluorescein.

Fenomena fluoresensi tergantung pada faktor-faktor berikut:

– pH medium tempat zat tersebut ditemukan. Semakin basa pH, semakin tinggi fluoresensi.      

– Konsentrasi zat tersebut.      

– Panjang gelombang cahaya yang bertindak sebagai exciter.      

Fluorescein memiliki beberapa aplikasi, dalam kedokteran hewan dan kedokteran, digunakan untuk mempelajari pembuluh darah di mata, dan untuk mendeteksi lesi di kornea. Ini juga digunakan untuk mendeteksi perubahan pada lakrimal.

Fluorescein disuntikkan ke dalam aliran darah, ke dalam vena perifer. Setelah beberapa detik, keberadaan pewarna dapat diamati di pembuluh retina mata. Dengan pewarnaan ini, dimungkinkan untuk menemukan kelainan yang mungkin ada di pembuluh retina dan iris.

Pewarna juga dapat diberikan secara oral, tetapi akan membutuhkan waktu setengah jam agar fluorescein terlihat di pembuluh mata.

Pada beberapa orang reaksi merugikan diamati, dibandingkan dengan penerapan fluorescein, seperti mual, muntah, sakit kepala, dan jika zat meninggalkan pembuluh darah dapat menyebabkan rasa sakit. Beberapa orang juga memiliki alergi terhadap zat ini.

Untuk mendeteksi lesi kornea, selembar kertas blotting yang dibasahi fluorescein diletakkan di permukaan mata. Saat pasien berkedip, tingtur disebarkan di atas lapisan air mata, yang merupakan zat yang mengandung air, minyak, dan lendir, untuk melindungi permukaan kornea. Ketika cahaya biru diproyeksikan pada mata, fluorescein akan dirangsang dan memancarkan cahaya, memperlihatkan setiap lesi yang mungkin ada di kornea.

Fluorescein juga digunakan dalam teknik laboratorium klinis yang berbeda untuk melakukan penelitian yang berbeda.

Misalnya, dalam teknik imunofluoresensi langsung atau tidak langsung, antibodi yang terkonjugasi dengan fluoresen digunakan, sehingga mereka dapat dideteksi saat diamati dalam mikroskop khusus, yang memancarkan cahaya dalam panjang gelombang yang sangat pendek (ultraviolet) untuk merangsang fluoresen.  

Antibodi berlabel ini dapat spesifik untuk antigen tertentu, yang akan dideteksi, atau dapat berupa antibodi gamma globulin anti-manusia, jika diinginkan untuk mendeteksi antibodi terhadap antigen tertentu. 

Selanjutnya, zat ini juga digunakan dalam teknik ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay), di mana antibodi berlabel fluorescein juga digunakan.

Scroll to Top