Selama evolusi, salah satu proses yang diperlukan untuk menetapkan bahwa dua populasi individu tidak termasuk dalam spesies yang sama diperlukan bahwa anggota mereka tidak mampu bereproduksi dengan sukses dan bahwa keturunan mereka tidak layak, atau steril. Terlepas dari jenis spesiasi yang terjadi, baik itu simpatrik atau allopatric, dalam jangka panjang spesies terdekat, yang memiliki spesies nenek moyang yang sama, akhirnya berbeda dalam mekanisme reproduksi mereka, baik dalam pacaran dalam interaksi fisik individu, waktu kawin atau alasan fisiologis atau genetik untuk ketidakcocokan antara gamet dari kedua jenis kelamin.
Mekanisme ini disebut isolasi reproduktif atau hambatan hibridisasi dan dapat terjadi sebelum kopulasi, pra-kopulasi, atau kemudian, pasca-kopulasi. Terlepas dari kapan mekanisme ini terjadi, mereka dikendalikan secara genetik dan merupakan bagian dari proses evolusi yang memisahkan dua spesies.
Dalam kelompok pertama adalah semua keadaan yang membuat anggota dua spesies tidak dapat melakukan persetubuhan. Diantaranya adalah bahwa mereka tidak memiliki musim kawin yang sama, bahwa mereka memiliki ritus kawin yang berbeda (lagu, pacaran) atau bahkan mereka tidak berada di wilayah geografis yang sama, bahwa penyerbuk adalah spesies yang berbeda, di samping itu, tentu saja, fisik. menghalangi perkawinan antar individu. Di dunia tumbuhan adalah tempat kita dapat menemukan mekanisme isolasi yang lebih besar dari jenis ini, terutama dalam spesialisasi penyerbuk. Namun, banyak spesies tanaman membantu bahwa hanya penyerbuk tertentu yang mampu mengambil serbuk sari dengan menciptakan bunga yang secara khusus menarik spesies serangga atau bahwa hanya burung dengan paruh tertentu yang dapat mencapai nektar di dalam bunganya (seperti halnya burung kolibri). ).
Mekanisme pasca-kopulasi adalah mekanisme yang mengintervensi jika yang pertama tidak terjadi. Contohnya adalah kemungkinan bahwa kuda dan keledai memiliki bagal keturunan silang, sterilitas keturunan ini disebabkan oleh mekanisme isolasi reproduksi, dalam hal ini ketidakcocokan genom untuk membentuk gamet yang stabil pada bagal dan bagal. Pada spesies lalat buah, vagina betina bereaksi terhadap penanda molekuler dari spesies lain, menyebabkan atrofi organ dan mencegah pembuahan. Pada spesies lain, pembuahan terjadi, tetapi penanda genetik spesifik masing-masing spesies untuk perkembangan embrio yang benar hanya ada sebagian dan aborsi alami terjadi.
Hal yang paling umum di alam adalah bahwa ada lebih dari satu mekanisme isolasi reproduksi yang memisahkan dua spesies. Mekanisme yang mencegah sanggama lebih efektif karena tidak ada energi yang terbuang dalam sanggama, pembuahan atau kehamilan. Banyak spesies tanaman angiosperma mampu menghasilkan hibrida, namun morfologi bunganya salah dan tidak memungkinkan penyerbukan atau pembuahan yang tepat. Namun, spesies hibrida steril ini dapat dipertahankan di alam dengan reproduksi aseksual, ini telah digambarkan sebagai kemungkinan untuk generasi spesies baru, seperti halnya gandum.